Précautions pour la coloration Pap

HealthSky fournit des kits de coloration Pap pour la coloration des frottis cellulaires gynécologiques et non gynécologiques en utilisant la technique développée par George Papanicolaou.

La coloration Pap comporte quatre étapes: 1. Fixation; 2. coloration nucléaire; 3. coloration cytoplasmique; 4. Dégagement.

Les principales exigences sont les suivantes: 1. Structure nucléaire claire; 2. Haute transparence; 3. Différenciation correcte des couleurs.

Sur la base des exigences ci-dessus, il existe plusieurs précautions de coloration Pap:

Mauvaise coloration nucléaire

(1) coloration nucléaire légère:

1) Le temps de différenciation de l'acide chlorhydrique est trop long ou le temps de coloration de l'hématoxyline est trop court. Raccourcissez le temps de différenciation ou prolongez le temps de bleuissement; ajoutez une petite quantité de solution d'hématoxyline fraîche par jour ou préparez une nouvelle solution d'hématoxyline.

2) Séchage du frottis avant fixation. Par conséquent, le strict respect des principes de fixation par voie humide est requis pour la préparation de frottis de coloration Pap.

3) Le pH de l'eau du robinet est légèrement acide. Utilisez une solution alcaline.

(2) coloration nucléaire sombre:

1) concentration insuffisante de solution d'acide chlorhydrique. Ajouter quelques gouttes d'acide chlorhydrique pour augmenter la concentration de manière appropriée.

2) La fixation avec une concentration d'alcool supérieure à 95% peut entraîner une sur-coloration. Utilisez de l'alcool 95% pour la fixation.

Mauvaise coloration cytoplasmique

(1) Si le frottis entier présente une coloration cytoplasmique légère, prolongez le temps de coloration ou remplacez-le par une solution fraîche.

(2) Si le cytoplasme n'est pas différencié et apparaît uniformément rouge clair, cela peut être dû au séchage du frottis avant la fixation ou à l'interférence d'un grand nombre de bactéries de type cocci. Dans ce cas, l'extension du temps de coloration peut partiellement corriger le manque de différenciation.

(3) La coloration cytoplasmique grise ou violette est due à une coloration prolongée de l'hématoxyline ou à une mauvaise différenciation avec l'acide chlorhydrique. La re-coloration avec de l'hématoxyline après décoloration peut corriger cela.

(4) En raison de la variation des spécimens, la même formule de coloration EA peut entraîner un biais vers le bleu, le vert ou le rouge. Différentes solutions EA doivent être utilisées pour différents spécimens. Généralement, EA36 et EA50 sont utilisés pour les spécimens gynécologiques, tandis que EA65 ou EA modifié est utilisé pour les échantillons non gynécologiques.

(5) Une autre raison importante du manque de différenciation cytoplasmique est la valeur de pH inappropriée de la solution de coloration EA. Si la coloration est rouge, l'ajout d'un peu de solution d'acide phosphotungstique peut le corriger; si la coloration est uniformément bleue ou verte, l'ajout d'une petite solution saturée de carbonate de lithium peut le corriger. Pour les solutions de coloration EA modifiées, l'ajout de 2ml d'acide acétique glacial par 100ml de solution de coloration peut améliorer l'effet de coloration et prolonger la longévité de la solution.